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液相色譜儀的分離系統(tǒng)由色譜柱、色譜柱的連接部件、柱恒溫裝置和固定相等組成。一、色譜柱:液相色譜儀的色譜柱一般用內(nèi)部拋光的不銹鋼制成,柱內(nèi)徑為1~4mm,柱長為10~50cm,柱形多為直形,內(nèi)部充滿微粒固定相。近年來,由于高性能填充劑的細粒化,3~5um微粒填料的使用,趨向柱內(nèi)徑為...
柱溫箱是液相色譜儀分析中用來控制液相色譜柱溫度的溫度控制儀器。能準確、穩(wěn)定地控制液相色譜柱的穩(wěn)定性。有利于提高液相色譜柱的靈敏度,提高光譜峰的分辨率,加快分離速度,縮短分析時間,保證分析結(jié)果。準確度和再現(xiàn)性。對于高效液相色譜儀而言,柱溫的升高可以加快分離過程,但樣品的不穩(wěn)定保留時間會增加檢測的難度,分辨率也會降低。相反,當柱溫較低時,分離分辨率提高,但分離過程時間較長,因為在低溫條件下,流動相粘度的增加會延長檢測時間,增加泵的磨損。同時,溶解度的相對降低將導致緩沖鹽結(jié)晶現(xiàn)象和...
液相色譜主要用于對吸收紫外線的液態(tài)有機物(不飽和有機物)進行定性、定量分析和純度分析,定性,是保留時間的特征峰值。沒有辦法分析物質(zhì)結(jié)構(gòu),但如果已知的物質(zhì)是x,則要測量的物質(zhì)可以與x標準物質(zhì)比較。液相色譜測定表明,該物質(zhì)的停留時間相同,測定結(jié)果表明,該物質(zhì)主要用于測試中的色譜鑒定。影響液相色譜儀分離度的因素有色譜柱填充性能、流動相和流速等。一、色譜柱填充性能:液相色譜柱的分離性能由固定相粒度、柱長和柱壓降(由柱內(nèi)徑和柱填充狀況決定)決定,這三個參數(shù)度也決定了樣品組分的保留時間。...
制備色譜是以分離出純物質(zhì)為目的的色譜系統(tǒng),分析色譜是以分析出樣品組分信息為目的的色譜系統(tǒng),基于他們目的的不同,制備色譜相對于分析色譜有很多不同特征,不能簡單等同。當我們在實驗室中想得到納克乃至毫克級的純物質(zhì)時,稍微改裝下分析型色譜系統(tǒng)就能簡單輕松的完成,不過,若所需制備的純品量很大,此時,再用分析型色譜系統(tǒng)分離純化,可以預見這將是一場“災難”。制備色譜常用的色譜模式有低壓,中壓,高壓三種,以應對不同類型和不同純度要求的樣品的分離,同時盡可能減少成本。低壓:一般而言,低壓適合易...
高效液相色譜系統(tǒng)使用液體作為流動相,采用高壓輸液系統(tǒng)將不同極性的單一溶劑或流動相,如不同比例的混合溶劑和緩沖液,泵入裝有固定相的色譜柱中。色譜柱中的組分分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現(xiàn)樣品的分析。高效液相色譜系統(tǒng)根據(jù)分離機制的不同,HPLC原理可分為離子交換色譜法、分子排阻色譜法及液液分配色譜法。1、離子交換高效液相色譜法:固定相是離子交換樹脂。樹脂上可電離離子與流動相中具有相同電荷的離子及被測組分的離子進行交換,根據(jù)各離子與離子交換基團具有不同的電荷吸引力而分離。2、分...
提高液相色譜中柱效的有效途徑有:減小填料粒徑,增加色譜柱長,使用盡量大小均一、外型規(guī)則的填料,使用合適的流速,使用合適的流動相組成,使用合適的固定相。高效液相色譜的工作方式:在柱層析中,溶劑在重力作用下滴入裝有吸附劑的色譜柱中。高效液相色譜是一種改進的柱色譜。在高達400個大氣壓的高壓下,泵輸送溶劑通過色譜柱。柱吸附劑或固定相通常是由固體顆粒(如二氧化硅或聚合物)制成的顆粒材料。與柱色譜相比,利用泵輸送,不僅可以快速分析,而且可以使用更小的顆粒作為柱填料。粒子越小,其表面積更...
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